Expresión heteróloga y purificación de Green Fluorescent Protein para su atrapamiento en nanohíbridos con sílica biomimética

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dc.contributor.advisorBetancor Dutrenit, Lorenaes
dc.contributor.advisorLouge Argañaraz, Josefinaes
dc.contributor.authorLarrieux Idarreta, Natalia Carolinaes
dc.contributor.authorMaresca Stewart, Francisco Javieres
dc.contributor.tribunalTucci Pi, Paula Isabeles
dc.contributor.tribunalJackson Carvalho, Eriennees
dc.date.accessioned2017-06-14T14:43:52Z
dc.date.available2017-06-14T14:43:52Z
dc.date.issued2015es
dc.descriptionIncluye bibliografía e índice de abreviaturases
dc.description.abstractEl objetivo principal del presente proyecto fue alcanzar la expresión y purificación de una variante de la Green Fluorescent Protein (GFP) y su posterior atrapamiento en nanopartículas de sílica biomimética para generar nanohíbridos de sílica-GFP estables. La primera etapa implicó la generación de un sistema de expresión funcional para GFP en Escherichia coli que permitiera facilitar su purificación mediante un paso cromatográfico de afinidad. Luego se desarrolló un protocolo de purificación, que permitió recuperar la proteína con un rendimiento del 43,5% y un factor de purificación de 110,3. Como la GFP obtenida luego del procedimiento de purificación desarrollado poseía un alto grado de pureza, se procedió a su inmovilización en nanopartículas de sílica biomimética. Las nanopartículas de este material son fáciles de sintetizar, y tienen la capacidad de ser funcionalizadas de forma efectiva y atrapar biomoléculas, generando nanohíbridos con un rango más amplio de aplicaciones y funciones. Los nanohíbridos sintetizados fueron caracterizados morfológicamente mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM). Finalmente, se realizaron estudios preliminares de estabilidad de fluorescencia de la proteína obtenida, tanto inmovilizada como soluble, desafiándola en distintas condiciones de pH y de composición del medio, utilizando DMEM y PBS. Se determinó que tanto la proteína soluble como inmovilizada en los nanohíbridos disminuye su intensidad de fluorescencia luego de 20 horas de incubación en DMEM o PBS.es
dc.format.extent53 p. il., fot., tbls., grafses
dc.identifier.citationMaresca Stewart, F. J. (2015). Expresión heteróloga y purificación de Green Fluorescent Protein para su atrapamiento en nanohíbridos con sílica biomimética (Trabajo de Grado). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingeniería. Recuperado de https://rad.ort.edu.uy/handle/20.500.11968/3179es
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.11968/3179
dc.languageEspañoles
dc.publisherUniversidad ORT Uruguayes
dc.relation.otherhttps://bibliotecas.ort.edu.uy/bibid/81418es
dc.subjectPROYECTOS-BIes
dc.subjectPROTEÍNASes
dc.subjectNANOTECNOLOGÍAes
dc.subjectCROMATOGRAFÍAes
dc.titleExpresión heteróloga y purificación de Green Fluorescent Protein para su atrapamiento en nanohíbridos con sílica biomiméticaes
dc.typeTrabajo final de carreraes
ort.thesis.careerFI - Licenciatura en Biotecnología - BIes
ort.thesis.degreegrantorFacultad de Ingenieríaes
ort.thesis.degreelevelCarrera Universitariaes
ort.thesis.degreenameLicenciado en Biotecnologíaes
ort.thesis.degreetypeTrabajo de Gradoes
ort.thesis.noteTrabajo de Grado (Carrera Universitaria). Universidad ORT Uruguay, Facultad de Ingenieríaes
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